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在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，我們經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶的內(nèi)部有黑點(diǎn)，這些黑點(diǎn)很有可能是受到污染而出現(xiàn)的，那么，如果瓶?jī)?nèi)出現(xiàn)黑點(diǎn)，我們?cè)撊绾翁幚砟兀?/span>
瓶子內(nèi)部出現(xiàn)黑點(diǎn)，我們首先要判斷這些黑點(diǎn)是不是污染，可以通過(guò)黑點(diǎn)的大小、形狀、運(yùn)行速度等方面進(jìn)行判斷，如果判定黑點(diǎn)是污染，我們可以參照以下方法進(jìn)行處理：

如果是懸浮細(xì)胞：手機(jī)細(xì)胞上清慢速離心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶。如果是貼壁細(xì)胞：將細(xì)胞用PBS潤(rùn)洗2-3遍，洗的時(shí)候，輕輕拍打瓶體，讓貼壁不牢的碎片和顆粒脫落，然后再棄去PBS，消化時(shí)先加低濃度的胰酶如0.05%胰酶消化1 min左右，讓細(xì)胞間隙中的顆粒和碎片脫落下來(lái)，去掉低濃度胰酶，然后正常消化細(xì)胞，將收集的細(xì)胞懸液慢速離心(500-600 rpm/min，5-6 min)并更換新的培養(yǎng)瓶，并可以嘗試適當(dāng)增加血清濃度進(jìn)行培養(yǎng)。

另外，如果細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)液變渾濁，則說(shuō)明細(xì)菌污染已經(jīng)比較嚴(yán)重，請(qǐng)及時(shí)將細(xì)胞處理后丟棄。避免出現(xiàn)黑點(diǎn)要從培養(yǎng)基PH值、水質(zhì)、器皿的清潔等多方面進(jìn)行注意，在消化細(xì)胞的時(shí)候要掌握好時(shí)間，防止消化過(guò)度產(chǎn)生細(xì)胞碎片。