在利用細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細胞的過程中,我們會遇到各種各樣的狀況,細胞生長緩慢就是其中的一類。那么,出現(xiàn)這種情況的原因是什么,又該如何解決呢?
細胞生長緩慢的原因是多方面的,主要包括以下幾點:
1.由于更換不同培養(yǎng)液或血清;
2.培養(yǎng)液中一些細胞生長必須成分如谷氨酰胺或生長因子耗盡或缺乏或已被破壞;
3.培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;
4.試劑保存不當;
5.接種細胞起始濃度太低;
6.細胞已老化;
7.支原體污染。
解決方案:
1.比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗,讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;
2.換入新鮮配置培養(yǎng)液,或補加谷氨酰胺及生長因子;
3.用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物;
4.血清需保存在-10到-20℃。培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存。含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,需在1周內用完;
5.增加細胞培養(yǎng)瓶中接種細胞起始濃度;
6.換用新的保種細胞;
7.分離培養(yǎng)物,檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物。
總之,如果細胞培養(yǎng)瓶內的細胞生長緩慢不要恐慌,找到原因之后,我們就可以根據具體原因制定解決方案。
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