細胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,使細胞生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)瓶是貼壁細胞培養(yǎng)常用的一種細胞耗材,在細胞培養(yǎng)過程中,我們經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)液體中出現(xiàn)一些雜質(zhì)積淀,出現(xiàn)這種情況的原因是多方面的,溫度也是其中常見的一種原因。
細胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)沉淀有可能是細胞產(chǎn)生了污染,如果排除污染,細胞培養(yǎng)基中的渾濁通常被解釋為金屬元素、蛋白和其他培養(yǎng)基組分的沉淀。沉淀物大多損害細胞正常增殖,因為他們通過螯合吸取培養(yǎng)基養(yǎng)分和其他需要的組分,從而改變培養(yǎng)基的組成。沉淀物可通過顯微鏡觀察,可能會干擾需要成像分析的實驗。
在細胞培養(yǎng)中,溫度是引起沉淀的主要因素之一。當所處溫度發(fā)生極端變化時,從溶液中會析出高分子量血漿蛋白;熱失活和凍融循環(huán)能促進蛋白降解和沉淀;因為液體或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲存,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲存液。
當然,細胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)沉淀,若確定是溫度原因,需要注意培養(yǎng)基的儲存環(huán)境及操作方法,避免反復凍融,這樣可以降低沉淀的出現(xiàn)概率。
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