貼壁細胞培養(yǎng)的時候,細胞不貼壁是令人非常頭疼的問題。而在懸浮細胞培養(yǎng)時同樣有問題困擾科研人,那就是細胞成簇。如果細胞搖瓶中的細胞成簇是什么原因呢,我們又該怎么辦呢?
在懸浮細胞培養(yǎng)過程中,細胞抱團生長是常見的一種情況,其原因是多方面的,如換液離心后沒有重懸,也有可能是培養(yǎng)基中的血清問題、或者鈣鎂離子濃度的變化造成了細胞間的粘附力改變;蛋白酶過度消化使得細胞裂解等。細胞結(jié)團會阻礙細胞獲取關(guān)鍵的營養(yǎng)素,不利于其健康成長。
如果發(fā)現(xiàn)細胞搖瓶中的細胞成簇,我們可以用無鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細胞,輕巧吹吸;細胞獲得單細胞懸液;分離培養(yǎng)物,檢測支原體;如果感覺有死細胞的 DNA,在細胞懸液中加入幾滴無菌的 DNAse(1mg/ml 溶于水)將 DNA 鏈打斷,輕柔地吹打細胞,防止對細胞膜造成物理損傷。
在細胞搖瓶培養(yǎng)細胞的過程中,我們可能會遇到各種各樣的問題,細胞成簇僅僅是其中的一種。遇到問題后我們可以通過分析找到原因,制定相應(yīng)的解決方案,或吸取經(jīng)驗,在以后的實驗中盡量避免這種情況。