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今天富道細(xì)胞跟大家講述一下如何利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞傳代的操作方式。

首先我們要先吧準(zhǔn)備傳代的細(xì)胞在鏡下觀察，需要挑選一些生長狀態(tài)良好的，細(xì)胞界限情緒，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。

然后需要配置細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi)，加入滅活小牛血清10m1，慶大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。消化細(xì)胞；先用PBS 洗液沖洗細(xì)胞表面1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細(xì)胞培養(yǎng)瓶平放，使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。

細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，再加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4 天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。

這就是富道細(xì)胞為大家描述的如何利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶方面進(jìn)行細(xì)胞傳代的操作方式。