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我們在細胞培養(yǎng)過程中，為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或原代細胞株，要將細胞凍存。今天就跟大家分享一下凍存管凍存原代細胞技術。

首先我們要知道我們在細胞凍存的時候，是有一些先決條件的，比如我們在觀察原代細胞時要選用生長數(shù)量好且多的細胞，而且在使用凍存管進行凍存之前還需在前一天換液。而且我們在使用凍存管進行凍存貼壁細胞的時候需要用胰酶將細胞消化下來，后續(xù)將懸液置于離心管之中進行離心之后，在將清液棄用，后續(xù)沉淀的時候可以加培養(yǎng)液（一般為二甲亞砜或甘油的培養(yǎng)基）。

后續(xù)需要進行懸液分管，在分管的時候切記封口一定要嚴，且不能超過凍存管的容量，否則會在復蘇和凍存的時候會發(fā)現(xiàn)管壁爆裂。在密封好凍存管之后需要進行詳細記錄，如使用sbs凍存管也需要及時進行錄入詳細信息，或者用記號筆標明細胞種類和凍存日期。

需要注意的是使用凍存管凍存的溫度一般用液氮的溫度－196℃，但是是以一定的冷卻速度凍存，最終保存于液氮中，可以按照以下順序進行降溫：室溫→4℃（20分鐘〕→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃過夜）→液氮，在這種極低的溫度下，細胞保存的時間幾乎是無限的。這就是給大家分享的凍存管凍存原代細胞技術了，希望對大家有所幫助。