細(xì)胞工廠多用于大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)實驗中,在培養(yǎng)細(xì)胞的同時,我們需要監(jiān)控細(xì)胞的生長狀況,那么,衡量細(xì)胞生長狀況的指標(biāo)有哪些呢?
1.細(xì)胞生長曲線:細(xì)胞生長曲線是細(xì)胞培養(yǎng)實驗中最基本的指標(biāo),是測定細(xì)胞絕對增長數(shù)值和生長繁殖基本規(guī)律常用的簡便方法。常用的方法為:在同一規(guī)格的培養(yǎng)瓶中,接種同等量的同一代細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后每隔24小時取出幾瓶細(xì)胞進(jìn)行計數(shù),以培養(yǎng)時間為橫座標(biāo),不同時刻的細(xì)胞數(shù)的對數(shù)為底座標(biāo),標(biāo)出各點并連成線,即為該細(xì)胞的生長曲線,可反應(yīng)出細(xì)胞生長的動態(tài)。
2.細(xì)胞生長倍數(shù):是指測定接種時活細(xì)胞的濃度,經(jīng)一個生長周期達(dá)到最大活細(xì)胞濃度的比率。
3.細(xì)胞分裂指數(shù):是表示細(xì)胞增殖旺盛程度的指標(biāo)。它以被測1000個細(xì)胞中的分裂細(xì)胞數(shù)來計算。其方法為:用秋水仙素將細(xì)胞處理1~2小時后,按染色體制片法制片并染色,計算1000個細(xì)胞中分裂相的數(shù)目,重復(fù)4次取平均值,用百分比表示。
4.細(xì)胞接種存活率:又稱細(xì)胞貼壁率。它是細(xì)胞被制成分散的懸液后,以低密度(2~5個細(xì)胞/cm2)被接種到細(xì)胞工廠中,貼壁并能存活生長形成細(xì)胞小群(克隆)的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)值,用以表示細(xì)胞的生存能力和細(xì)胞群的活力。
5.克隆形成率:克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。由于細(xì)胞生物學(xué)性狀不同,細(xì)胞克隆形成率差別也很大,一般初代培養(yǎng)細(xì)胞克隆形成率弱,傳代細(xì)胞系強;二倍體細(xì)胞克隆形成率弱,轉(zhuǎn)化細(xì)胞系強;正常細(xì)胞克隆形成率弱,腫瘤細(xì)胞強。并且克隆形成率與接種密度有一定關(guān)系,做克隆形成率測定時,接種細(xì)胞一定要分散成單細(xì)胞懸液,直接接種在碟皿中,持續(xù)一周,隨時檢查,到細(xì)胞形成克隆時終止培養(yǎng)。
以上是衡量細(xì)胞工廠中細(xì)胞生長狀況的有關(guān)指標(biāo),通過這些指標(biāo)可以判斷細(xì)胞在培養(yǎng)容器中的生長情況,以便及時發(fā)現(xiàn)情況,做出調(diào)整。