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我們在使用細胞搖瓶培養(yǎng)HEK293細胞時，肉眼觀察不到結團，但是在細胞計數(shù)儀上會觀察到細胞有幾個黏連，似葡萄狀相連的現(xiàn)象。在出現(xiàn)這種現(xiàn)象時我們注意以下幾點：

第一，使用細胞搖瓶換液時動作要輕。

第二，293細胞在低代時容易貼壁，生長良好，在傳到幾十代以后，易聚集成團，且貼壁不牢，用PBS沖洗時即可能脫落，即使消化后也不容易吹打成單細胞懸液。

第三，剛復蘇的293貼壁很慢，復蘇接種后24小時內,應盡量減少觀察細胞次數(shù)或不作觀察,以免因晃動而影響細胞貼壁。復蘇后48小時左右觀察貼壁情況并進行首次更換培養(yǎng)基比較合適。

當然也有可能是消化過渡引起細胞損傷，釋放引起聚團的組物質。

1、消化得時候盡量溫和些；

2、細胞離心速度不宜過大或時間過長；

3、傳代得時候保證吹打均勻。

這就是我們在使用細胞搖瓶培養(yǎng)HEK293細胞時，肉眼觀察不到結團，但是在細胞計數(shù)儀上會觀察到細胞有幾個黏連，似葡萄狀相連的現(xiàn)象。在出現(xiàn)這種現(xiàn)象時我們注意的幾點方法了。