富道細胞在之前已經(jīng)簡單描述過了細胞工廠內(nèi)如果出現(xiàn)支原體污染的特征和表現(xiàn)方式,因為如果細胞工內(nèi)細胞被支原體污染,細胞工廠內(nèi)培養(yǎng)基一般情況下不會出現(xiàn)渾濁狀態(tài),那我們可以通過這四種檢測方式:
1.利用相差顯微境檢測支原體污染
將細胞工廠內(nèi)懷疑被支原體污染的細胞按種放在蓋玻片上,靜置一天后取出在使用相差油鏡進行輔助觀察細胞狀態(tài),之前簡單介紹過了支原體的呈現(xiàn)形狀,如果細胞工廠內(nèi)細胞被支原體污染,那么進行觀察后就會發(fā)現(xiàn)在細胞表面和細胞與細胞直接有一些暗色微小的顆粒在做不規(guī)則的運動。
2.熒光染色法
DNA熒光染色法是利用熒光染色劑雙苯咪唑Hoechst33258能夠結(jié)合支原體DNA中的A-T堿基富集區(qū)域的原理,被支原體污染的細胞經(jīng)染色后,其細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一的熒光點,即是富含A-T堿基區(qū)域的支原體DNA。
3.電鏡檢查
用掃描電鏡方法簡便快速一般細胞工廠中的細胞培養(yǎng)48~72小時,細胞接近匯合前,用胰酶消化細胞制成細胞懸液后進行固定、包埋、切片后才能進行觀察,也可以利用透射電鏡。
4.DNA分子條文檢查或支原體培養(yǎng)等方法
檢出率高,但方法較為復雜。
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