細(xì)胞污染是讓每個(gè)科研人員都比較頭疼的問題,在利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),稍不注意就會(huì)造成污染,導(dǎo)致之前的努力功虧一簣。在諸多的污染源中,支原體污染是常見的一種。出現(xiàn)這種污染后一般會(huì)有如下表現(xiàn):
1.細(xì)胞外形可以沒有明顯的變化,支原體可以與細(xì)胞共存,污染后細(xì)胞液不會(huì)死亡,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁;
2.使用被支原體污染的細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)會(huì)嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,因?yàn)橹гw會(huì)抑制細(xì)胞生長;導(dǎo)致染色體畸變;細(xì)胞膜抗原性改變;細(xì)胞復(fù)蘇后存活率降低等。
3.影響細(xì)胞培養(yǎng)瓶中細(xì)胞的代謝和功能:培液中的精氨酸被支原體大量消耗,引起細(xì)胞蛋白質(zhì)、DNA、rRNA、mRNA的合成障礙;支原體活動(dòng)使培液成分發(fā)生改變(如發(fā)酵型支原體降解糖類產(chǎn)生酸性物質(zhì)),影響細(xì)胞代謝。
4.培養(yǎng)過程中細(xì)胞破碎較多,培養(yǎng)基pH變化明顯,需要頻繁更換新鮮培養(yǎng)基;
5.細(xì)胞被支原體污染后會(huì)形成共生體系導(dǎo)致污染不斷擴(kuò)大。
造成細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)支原體污染的原因是多方面的,如細(xì)胞間的交叉污染;操作人員的口腔、皮膚等;工作環(huán)境或?qū)嶒?yàn)器材的污染;培養(yǎng)基污染等。對(duì)于支原體污染,我們要以預(yù)防為主,在各個(gè)環(huán)節(jié)都要嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作。