作為一種多層結構的細胞培養(yǎng)容器,細胞工廠收獲細胞時相較于普通的容器要復雜,而收獲細胞又是關系到試驗效果的重要環(huán)節(jié)。注意以下這五點,收獲細胞穩(wěn)穩(wěn)的。
1、棄去培養(yǎng)液后使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液(CMF-PBS)清洗細胞工廠(40~50 mL/層),若有需要重復清洗一次,確保將殘留的培養(yǎng)液清洗干凈。
2、加入消化液平均分布到每層(10~40 mL/層),輕輕前后左右傾斜培養(yǎng)器,確保消化液完全浸過培養(yǎng)面,細胞出現間隙時,棄去消化液,輕輕拍擊容器幫助細胞從生長面脫離。
3、由于是多層結構,不能清晰觀察中間層的細胞消化狀態(tài),建議參照完全相同培養(yǎng)條件下的培養(yǎng)瓶 或單層容器的消化狀態(tài)?;蚴褂脤S玫亩鄬蛹毎囵B(yǎng)器觀察臺來觀察每層細胞的生長狀態(tài)。
4、若細胞懸液收集完成后,培養(yǎng)層仍存在大量細胞,則需要清洗多次或調整細胞消化的操作。
5、培養(yǎng)溫度及CO2濃度的偏差可能影響到細胞的收獲率,需密切關注培養(yǎng)過程中的溫度和CO2濃度設定值是否滿足需求。
雖然收獲細胞時過程略顯繁瑣,但細胞工廠培養(yǎng)面積大,占用空間小,還可以通過配套管路實現密閉培養(yǎng),降低細胞污染風險。這些優(yōu)勢也讓其成為生物制藥、疫苗、細胞與基因治療產品研發(fā)與生產中不可或缺的工具。
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