世上的細(xì)胞千千萬,想要養(yǎng)好細(xì)胞可要費一番心思。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,我們會遇到各種各樣的問題,其中細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞空泡化就是常見的一種。出現(xiàn)這種情況,可以從以下幾個方面分析原因。
1.細(xì)胞老化:原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中經(jīng)常出現(xiàn)這樣的情況,有些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài),不會再分裂,時間長了就會空泡化而死亡。
2.胰酶消化:消化時間過長也會影響細(xì)胞的狀態(tài),出現(xiàn)空泡現(xiàn)象。此外,消化細(xì)胞時吹打力度控制不好會產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致空泡化這種現(xiàn)象。
3.PH值:如果細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)液的PH值與細(xì)胞正常所需PH值差別太大,也容易導(dǎo)致空泡化現(xiàn)象。
4.自噬:細(xì)胞缺乏營養(yǎng)導(dǎo)致饑餓誘導(dǎo)形成自噬也會形成空泡化,但是這種空泡在光學(xué)顯微鏡下是看不到的,只有在電鏡下才能觀察到。
5.污染:一旦一些細(xì)胞出現(xiàn)空泡化,繼續(xù)培養(yǎng),空泡范圍會擴大,即使傳代后也如此,出現(xiàn)這種情況,細(xì)胞基本無法挽救。后來檢測發(fā)現(xiàn),此種細(xì)胞存在支/衣原體的感染。
6.細(xì)胞代謝:在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,由于血清濃度不夠、藥物作用、外界刺激等情況下導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問題,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀況下會出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的情況。
細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)空泡化現(xiàn)象可以從以上六個方面進行具體分析,找出具體原因之后,采取相應(yīng)的措施。