我們?cè)诩?xì)胞培養(yǎng)的過程中,為了減少細(xì)胞代謝從而達(dá)到長期儲(chǔ)存的目的,或者需要進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)時(shí)就使用凍存管將細(xì)胞進(jìn)行凍存起來,但是我們?cè)谑褂脙龃婀軙r(shí)總會(huì)遇到一些問題,富道細(xì)胞根據(jù)客戶使用情況整理了一下使用凍存管凍存細(xì)胞的注意事項(xiàng),會(huì)從細(xì)胞凍存時(shí)機(jī)、細(xì)胞凍存數(shù)量、凍存管的選擇、溫度多個(gè)方面進(jìn)行說明:
使用凍存管凍存細(xì)胞時(shí)的時(shí)機(jī)需要掌握好,如果細(xì)胞狀態(tài)不好如:培養(yǎng)液變得很黃了或者細(xì)胞被污染甚至開始凋亡或崩解進(jìn)行凍存后肯定是不行。我們應(yīng)該在細(xì)胞細(xì)胞增殖旺盛,情況穩(wěn)定,試驗(yàn)效果良好,復(fù)蘇后兩周內(nèi),進(jìn)行凍存細(xì)胞。
細(xì)胞凍存數(shù)量也需要進(jìn)選擇好,如果凍存時(shí)細(xì)胞濃度低于1-5×1000,000/ml復(fù)蘇就很難成功了。所以我們要在離心之后調(diào)整進(jìn)行凍存的細(xì)胞濃度,但是不要重新洗細(xì)胞。
我們?cè)趦龃婀艿倪x擇上要選擇正規(guī)廠家的耗材且凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復(fù)蘇水浴時(shí)會(huì)滲水,造成污染。選擇原配的管子和蓋子(不同牌子/型號(hào)的顏色會(huì)有差別)。
前期準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備好之后我們?cè)谑褂脙龃婀苓M(jìn)行凍存之后還需要注意在逐步凍存的時(shí)候不要在-80度的時(shí)間太長且要定期測量液氮儲(chǔ)備,保證細(xì)胞全部浸在液面下。
這就是富道細(xì)胞在分享的一些使用凍存管凍存細(xì)胞時(shí)的注意事項(xiàng)了,希望對(duì)大家有所幫助。