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我們?cè)谑褂?a href="http://www.essan.cn/sbgc/12.html" target="_blank">細(xì)胞工廠等細(xì)胞培養(yǎng)耗材培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)要對(duì)細(xì)胞做常規(guī)性檢查。觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)情況以及培養(yǎng)的pH變化、有無(wú)污染等。根據(jù)細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化，做換液或傳代處理，如發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)及時(shí)采取措施。一般會(huì)從以下四個(gè)方面進(jìn)行觀察：

1.細(xì)胞形態(tài)

細(xì)胞工廠內(nèi)生長(zhǎng)狀態(tài)良好的細(xì)胞，在一般顯微鏡下觀察時(shí)可見(jiàn)，細(xì)胞透明度大、折光性強(qiáng)、輪廓不清。細(xì)胞生長(zhǎng)不良時(shí)，輪廓增強(qiáng)，胞質(zhì)中常出現(xiàn)空泡、脂滴和其他顆粒狀物，細(xì)胞之間空隙加大，細(xì)胞形態(tài)可變得不規(guī)則甚至失去原有特點(diǎn)，如上皮細(xì)胞變成類(lèi)上皮細(xì)胞等。

2. 細(xì)胞生長(zhǎng)

初代培養(yǎng)或傳代的細(xì)胞懸液接種以后，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)短不同的潛伏期后開(kāi)始增殖。傳代細(xì)胞系、胚胎組織或幼體組織一般在第二天即可見(jiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)，一周內(nèi)便可連接成片。接種細(xì)胞長(zhǎng)滿細(xì)胞工廠后，應(yīng)及時(shí)做再培養(yǎng)。否則由于營(yíng)養(yǎng)物消耗和代謝積累，細(xì)胞即進(jìn)入停止期或退化期。

3.營(yíng)養(yǎng)液

正常情況下，培養(yǎng)液呈桃紅色。如果細(xì)胞維持在pH6.5～6.6條件下，細(xì)胞會(huì)脫落死亡。當(dāng)細(xì)胞工廠內(nèi)培養(yǎng)液酸化變黃時(shí)，說(shuō)明培養(yǎng)液中代謝產(chǎn)物已堆積到一定量，需要更換新鮮培養(yǎng)液。培養(yǎng)液中如加Hepes或用5％CO2溫箱培養(yǎng)可使pH維持相對(duì)穩(wěn)定。

4.微生物污染

微生物污染培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)物后會(huì)出現(xiàn)pH值改變，培養(yǎng)液呈現(xiàn)混濁狀。細(xì)菌感染后，由于細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)，光鏡觀察細(xì)胞工廠內(nèi)可見(jiàn)有微閃光；真菌感染則在鏡下見(jiàn)許多細(xì)絲狀菌絲，有時(shí)還密集有群集孢子；支原體的污染需要借助一些檢測(cè)手段才可檢出。

這就是富道細(xì)胞為大家分享的細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)四個(gè)觀察方面，希望對(duì)大家有所幫助。